УДК: 615.015.43; 615.322

 Юшкова Т.А., Зорина Е.В., Белоногова В.Д. ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России. Россия, 614990, г. Пермь, ул. Полевая, д.2.

Оценка антидиабетической активности экстракта травы alchemilla vulgaris

Цель работы. Оценить гипогликемическую и гиполипидемическую активности экстракта травы манжетки.

Ключевые слова: Alchemilla vulgaris L, гипогликеми- ческая и гиполипидемическая активность.

Контактное лицо:

Зорина Елена Владимировна

кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России. Россия, 614990, г. Пермь, ул. Полевая, д.2. Тел.: 89824862003,

e-mail: Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

Yushkova T.A., Zorina E.V., Belonogovа D.V.

 Perm state pharmaceutical academy of russian ministry of health. 2 polevaya str., perm, 614990, russia

Evaluation of antidiabetic activity of the herb extract alchemilla vulgaris

Aim. To evaluate the hypoglycemic and hypolipidemic activity of the extract of the herb Alchemilla vulgaris.

Key words: Alchemilla vulgaris L, hypoglycemic and hypolipidemic activity.

Contact person:

Zorina Elena

candidate of pharmaceutical Sciences, associate Professor of the Department of pharmacognosy with course of botany of plla the Ministry of health of Russia 2 Polevaya str., Perm, 614990, Russia Tel: 89824862003, e-mail: Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

Введение. Одним из приоритетных направлений современной медицины является профилактика и лечение сахарного диабета. Гипергликемия, гиперлипидемия, гиперглицеридемия и другие метаболические нарушения – это типичные проявления данного заболевания, приводящие к серьезным осложнениям. Синтетические препараты, применяемые для снижения ги- пергликемии, не решают проблемы комплексной нормализации обмена веществ, кроме того имеют ряд побочных эффектов. Преимуществом растительных источников является наличие в химическом составе различных биологически активных соединений – флавоноидов, полифенолов, полисахаридов, аминокислот, микроэлементов и др. Они имеют свои собственные особые механизмы действия, и используются, как в качестве монотерапии, так и в комплексной фармакотерапии сахарного диабета.

Alchemilla vulgaris L. издавна применяется отечественной народной медициной для лечения различных заболеваний, в том числе и сахарного диабета в качестве самостоятельного средства или в составе противодиабетических сборов [1]. В ряде научных работ описаны противоопухолевая, антиметастатическая активность настоя манжетки [2, 3]  и гемореологические свойства экстракта из травы манжетки [4].

Ранее нами показано, что настой травы манжетки проявляет гипогликемическое действие [5, 6].

 Цель исследования. Оценка гипогликемической и гиполипидемической активности водного экстракта травы манжетки сухого.

Материал и методы. Водный экстракт травы манжетки получали методом ускоренной дробной мацерации. Далее водную вытяжку упаривали под вакуумом до 1/10 объема, затем высушивали в распылительной сушилке [7]. Исследование острой  токсичности, гипогликемической и гиполипидемической активности осуществляли в соответствии с методическими указаниями [9]. Оценку биологической активности экстракта проводили на животных обоего пола: на 60 белых беспородных мышах массой 16-20 г и 132 крысах массой 200-250 г. Животные содержались в типовом виварии. Их питание осуществлялось в соответствии с нормами кормов для экспериментальных животных. Группы для исследования формировались методом случайной выборки с учетом массы тела в качестве определяющего показателя. В каждой серии использовали 6 животных.

На интактных животных исследовали влияние экстракта манжетки на уровень гликемии с целью исключения гипер- и гипогликемических состояний.

Выявление и характеристику гпогликемической активности экстракта травы манжетки осуществляли на интактных крысах, животных с углеводной нагрузкой и с экспериментальным диабетом. Углеводную нагрузку животным проводили пероральным введением глюкозы из расчета 2г/кг массы тела.

Экспериментальную гипергликемию моделировали подкожным введением аллоксана в дозе 170 мг/кг. Концентрацию глюкозы в крови животных определяли глюкозооксидазным методом с помощью набора «Фотоглюкоза» (ООО Импакт, Россия) до введения исследуемых образцов экстракта, а также через 30 и 120 мин после него. Крыс лишали пищи за 16 часов до опыта и на время его проведения.

О гиполипидемической активности фитопрепаратов судили по изменению уровня общего холестерина и триглицеридов [8]. Для определения общего холе- стерина использовали набор реагентов «Холестерин-22-ВИТАЛ» (АО «Витал Девелопмент Корпорэйшн», Россия), а триглицеридов –    «Триглицериды-12-ВИТАЛ»   (АО «Витал Девелопмент Корпорэйшн» Россия).

Интактным крысам, животным в тесте с углеводной нагрузкой и аллоксан-индуцированным диабетом вводили растворы экстракта в дозах 50, 25 и 12,5 мг/кг в виде раствора в объеме 1 мл. Уровень глюкозы в крови определяли через 30 и 120 мин после применения экстракта манжетки. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество растворителя.

В качестве фитопрепарата сравнения использовали настой побегов черники, который вводили перорально в объеме 1мл на 100г массы крысы. Тяжесть экспериментального диабета оценивали по уровню гликемии и дислипидемии на 3-и, 7-е и 14-е сутки после введения аллоксана. 

Данные исследований обработаны статистически с помощью программного пакета Microsoft Excel и Statistica 8.0. Для сравнения и ана- лиза результатов использовали критерий Стьюдента с оценкой достоверности отличий (p<0,05, p<0,01, p<0,001).

Результаты. Исследования острой токсичности показали, что экстракт травы манжетки относится к мало- токсичным лекарственным сред- ствам. При введении перорально максимальной дозы экстракта (10 г/кг) каких-либо проявлений токсического действия не выявлено, а расчетная ЛД50 экстракта составила 8 г/кг.

У интактных крыс в контроле и при введении водного экстракта травы манжетки, приготовленного в различных концентрациях, уровень глюкозы в крови не изменял- ся во все сроки наблюдения, о чем свидетельствует отсутствие достоверных отличий (табл. 1).

У крыс, подвергавшихся угле- водной нагрузке, уровень глюкозы в крови повышался в 2,1 раза по сравнению с таковым у интактных животных. Следует отметить, что к концу наблюдения у крыс, которым была введена глюкоза (контроль 2), её уровень достоверно снижался по сравнению с фоновым уровнем в 1,2 раза (табл. 2).

Установлено, что водный экстракт травы манжетки сухой достоверно снижал уровень глюкозы в крови крыс с углеводной нагрузкой, по сравнению с фоном во все сроки наблюдения. Гипогликемический эффект экстракта проявлялся  уже  к 30-й минуте эксперимента, усиливался к 120-й минуте и имел дозозависимый характер. Экстракт манжетки в дозах 50, 25 и 12,5 мг/кг через 30 минут после ведения снижал уровень сахара на 14, 15 и 12%, а через 2 часа торможение гипергликемии составило 30, 24 и 21% соответственно. О наличии гипогликемического действия у экстракта травы манжетки свидетельствуют также достоверные отличия между уровнем глюкозы в крови контроль- ных (нагрузка глюкозы) и опытных (экстракт травы манжетки сухой + нагрузка глюкозы) животных (табл. 2).

Развитие аллоксанового диабета сопровождалось достоверным увеличением уровня глюкозы, общего холестерина и триглицеридов. У крыс с аллоксановым диабетом уровень глюкозы в крови был в 2,2–2,4 раза выше, чем у интактных контрольных крыс. Экстракт травы манжетки у крыс с аллоксановым диабетом достоверно снижал уровень глюкозы в 1,6 – 1,2 раза, общего холестерина в 1,1 – 1,4 раза и триглицеридов в 1,8 – 3,2 раза, причем эти сдвиги были дозозависимыми. Наибольшую гипогликемическую и гиполипидемическую активность проявлял экстракт манжетки в дозе 50 мг/кг (табл. 3).

Настой побегов черники проявлял гипогликемическое и гиполипидемическое действие, которое характеризовалось снижением уровня  глюкозы,  общего   холестерина   и триглицеридов. Сравнительный анализ влияния обоих фитопрепаратов на аллоксановый диабет показал, что экстракт манжетки в дозе 50 мг/кг по выраженности гипогликемического действия уступал настою черники, но превосходил его по влиянию на уровень общего холестерина и триглицеридов. Об этом свидетель-ствуют достоверные отличия в соответствующих сериях опытов (табл. 3). Так, если экстракт тра- вы манжетки сухой снижал уровень триглицеридов в 3,2 раза, то настой черники – лишь в 2,1  (p < 0,001).

В эксперименте экстракт травы манжетки проявлял гипогликемическое действие независимо от тяжести химически вызванного нарушения углеводного об- мена. У интактных крыс уровень глюкозы в наблюдаемые сроки не имел достоверных отличий. Развитие аллоксанового диабета сопровождалось достоверным повышением уровня не только глюкозы, но и липидов в крови, и зависело от тяжести (сроков) экспериментального диабета (рис. 1, 2, 3). Если на третий день развития аллоксанового диабета уровень глюкозы повышался в 2,3 раза, то на 14-й день экспериментального диабета возрастал в 4 раза (рис.1).

На фоне введения экстракта травы манжетки сухого статистически достоверно снижались показатели глюкозы, общего холестерина и триглицеридов в крови во все сроки наблюдения. На 3-й день эксперимента торможение уровня гипергликемии составило от 15 до 36%, на 7-й день – от 16 до 33% и на 14 день – от 42 до 53% в зависимости от дозы экс- тракта (рис. 1).

Наибольший гиполипидемический эффект проявлял экстракт манжетки в  дозе  50  мг/  кг независимо от тяжести диабета. В течение эксперимента снижение общего холестерина составило от 14 до 25%. По выраженности гиполипидемического действия экстракт манжетки не  уступал  таковому  препарату сравнения – глибенкламиду (рис. 2).

Снижение показателей триглицеридов в крови на фоне введения экстракта  находилось в диапазоне от 30 до 53%. Глибенкламид изменял содержание триглицеридов от 56 до 65% (рис.3).

 Обсуждение. В результате проведенных исследований установлено, что экстракт травы манжетки относится к малотоксичным препаратам. Отсутствие изменения уровня глюкозы у интактных животных при введении экстракта манжетки позволяет исключить возможность проявления экстрактом гипер- или гипогликемических состояний.

 Эксперименты по выявлению и анализу фармакологической активности показали, что экстракт обладает гипогликемическим и гиполипидемическим действием, и оно носит дозозависимый характер.

 Механизм гипогликемического действия экстракта травы манжетки, вероятно, заключается в прямом воз- действии на усвоение глюкозы тканями организма. Настоящее предположение позволяют сделать результаты исследования по влиянию экстракта на уровень глюкозы в крови интактных крыс, а также животных, подвергавшихся углеводной нагрузке. По выраженности гипогликемического действия исследуемый экстракт несколько уступал фитопрепарату сравнения – настою из побегов черники, но превосходил его по влиянию на уровень липидов.

Принципиальное значение имеет способность экстракта проявлять гипогликемическое и гиполипидемическое действие независимо от тяжести химически вызванного нарушения углеводного обмена. Выявленная нами способность экстракта снижать уровень общего холестерина и триглицеридов свидетельствует о наличии у данного фитопрепарата гиполипидемического действия, не уступающего препарату сравнения – глибенкламиду.

Выводы. Водный экстракт травы манжетки сухой обладает типичными фармакологическими свойствами, присущими антидиабетическим препаратам. Гипогликемическое и гиполипидемическое действие экстракта возможно обусловлено наличием в его составе водорастворимых групп биологически активных веществ, оказывающих влияние на разные звенья патологических нарушений при сахарном диабете. Экстракт травы манжетки сухой является перспективным антидиабетическим препаратом растительного происхождения.

Список литературы

1.      Андреева В.Ю. Влияние экстракта манжетки обыкновенной на морфо- функциональные свойства эритроцитов при сердечно-сосудистой пато- логии / Андреева В.Ю. //Автореферат диссерт. на соиск. учен. степ. канд. фарм. Наук. – Томск, 2001. – 28 с.

2.      Баева В.М. Сравнительное изучение химического состава представителей рода манжетки / Баева В.М.,Сасов С.А. // Современные аспекты изучения лекарственных растений: сб. науч. тр. − М., 1995. – Т. 36. – С. 242-244.

3.      Зорина Е.В. Влияние фитопрепаратов на функциональную активность рецепторов инсулина/ Зорина Е.В., Олешко Г.И., Юшкова Т.А., Голышева Е.А.// Новая технологическая платформа биомедицинских исследований: материалы науч.-практ. конф., 16–17 октября. – Ростов – на - Дону, 2006. − С. 13.

4.      Зорина Е.В. Патент № 2356569 (2009). Способ получения средства, обладающего гипогликемической и иммуномодулирующей активностью / Зорина Е.В., Олешко Г.И., Юшков В.В., Юшкова Т.А.//Бюл. № 15. – 2009.

5.      Зорина  Е.В.  Гипогликемическая  и  гиполипидемическая  активность настоя травы манжетки / Зорина Е.В., Юшкова Т.А., Олешко Г.И., Юшков В.В. // I Съезд натуротерапевтов России: сборник научных трудов, 25 октября 2009 г., (приложение к специальному выпуску журнала «Традиционная медицина»). – Москва. – 2009. −№3(18). − С. 109 – 113.

6.      Камышников В.С. Методы клинических лабораторных исследований / Камышников В.С., Волотовская О.А., Ходюкова А.Б. и др. // Учебник [под ред. B.C. Камышникова ]. − 2-е изд., перераб. и доп. − Мн.: Белорус наука, 2002. − 775 с.

7.      Мурин И.И. Фитохимическое и фармакологическое изучение травы ман- жетки / Мурин И.И. // Автореферат диссерт. на соиск. учен. степ. канд. фарм. наук – Москва, 2011. – 28 с.

8.      Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению но- вых фармакологических веществ: учеб. пособие для послевуз. проф. об- разования врачей [под ред. Р.У. Хабриева]. – 2-е изд., перераб. и доп. – М.: Медицина, 2005. – 828 с.

 9.      Седова, А.Б. Лекарственные растения в лечении сахарного диабета / Седова, А.Б. Зорина Е.В. − Пермь, 2006. – 227с.